LABORATORIO DI BIOLOGIA SPERIMENTALE
Prof. Stefano Landi
Seguire bene le seguenti istruzioni
1)
L’attivita’ di
Laboratorio di Biologia Sperimentale prevede due componenti. Una “wet
laboratory” e una “dry laboratory”. Nella prima settimana (wet lab) si
allestiranno culture di sangue periferico di linfociti umani. Alcune culture
saranno trattate con il solo veicolo (controllo), altre saranno trattate con
una dose standard di Diepossibutano (DEB).
2)
Dalle culture si
otterranno preparati cromosomici (citogenetici). I vetrini cosi’ ottenuti
saranno codificati al fine di non identificare quale di essi provengono da
culture “trattate” e quali da culture di “controllo”. Gli orari del “wet lab”
sono prestabiliti e non sono flessibili.
3)
Le ore successive
saranno spese come “dry lab”. Per ogni cultura si dovranno conteggiare 100/150
metafasi. Ogni anomalia cromosomica (aberrazioni cromosomiche) dovra’ essere
registrata con tanto di coordinate del vetrino prese al microscopio. Le ore di
lettura delle metafasi potranno essere gestite sulla base degli impegni dello
studente, secondo turni prestabiliti. E’ previsto un confronto con i docenti
per sciogliere eventuali dubbi su alcune figure cromosomiche che possono essere
osservate. Si suggerisce dove possibile di fotografare le metafasi dubbie anche
col proprio cellulare per agevolare il confronto.
4)
Successivamente al
conteggio finale verranno svelati i codici e si identifichera’ la differenza
tra il rate di aberrazioni cromosomiche presenti nelle culture di controllo e
quelle presenti nelle culture trattate. Si dovrebbero osservare alcuni
riarriangiamenti cromosomici particolari con un generale aumento della
frequenza di aberrazioni cromosomiche nelle culture trattate con DEB.
5)
I dati ottenuti
verranno analizzati statisticamente.
6)
Il gruppo di lavoro
consiste in soli 4 studenti. Il numero massimo che accettiamo nel nostro
laboratorio e’ composto da 8 studenti che verranno suddivisi in due turni da 4.
7)
In fondo a questa pagina
potete osservare quanti posti sono ancora disponibili e in che date.
8)
La prova finale
consistera’ nello scegliere dalla letteratura scientifica un articolo a vostro
piacimento dove sia stato utilizzato il test delle aberrazioni cromosomiche
(suggerimento: cercare in PubMed la parola chiave “chromosome aberration assay”
o similari), articolo che dovra’ essere ben studiao e verra’ poi discusso con i
docenti.
9)
Se interessati,
potete inviare una e-mail indicando la
data di interesse. NOTA IMPORTANTE: dato che i posti sono limitati e la
richiesta elevata, se pensate di cambiare tipo di attivita’ comunicatecelo il
prima possibile al fine di liberare posti per altri studenti.
Ci sono 8 posti disponibili per ogni tornata e i seguenti iscritti
in lista.
Per inserirsi nelle liste di attesa occorre iscriversi con la
procedura fai-da-te utilizzando il sito e-learning (cercare il “Laboratorio di
Biologia Sperimentale”)
https://polo3.elearning.unipi.it/mod/data/view.php?id=13369